Каріотипування
Поняття та визначення
Ген – це лінійна ділянка молекули ДНК, яка несе в собі інформацію про формування якоїсь певної ознаки. Послідовно розташовані гени формують молекулу ДНК. Зв’язані з білками ядра молекули ДНК формують хромосоми. У цих структурах зосереджена більша частина спадкової інформації. Саме вони зберігають, реалізують і передають її наступному поколінню. Особливістю хромосом є те, що вони чітко видимі у світловому мікроскопі лише у період поділу клітини.
Каріотип – сукупність ознак (число, морфологія тощо) повного набору хромосом, яка притаманна клітинам даного організму або лінії клітин (клон).
Каріотипування (Karyotyping) – стандартне цитогенетичне дослідження на основі аналізу хромосом культивованих лімфоцитів периферичної крові, що дозволяє виявляти відхилення в структурі та кількості хромосом. Цей метод дослідження дає можливість виключити хромосомні аномалії та встановити каріотип наданого генетичного матеріалу.
Методи цитогенетики
Метою цитогенетичного дослідження є отримання із ядер соматичних клітин (як правило, лімфоцитів крові), зафіксованих на предметному склі хромосом, їх диференційне пофарбування по довжині та аналіз у світловому мікроскопі.
Техніка диференційного пофарбування хромосом (GTG-бендінг) – найбільш поширена у діагностичній практиці.
GTG-бендінг – це метод фарбування хромосом з використанням трипсину за методом Романовського-Гімзи. Внаслідок цього хромосоми набувають характерного смугастого вигляду.
Далі оцінюються наступні характеристики:
- Кількість хромосом;
- Морфологія хромосом;
- Розташування смуг на кожній із хромосом.
Каріограма – порядкове представлення 46 хромосом (каріотипу), що зафарбовані спеціальним методом GTG-бендінг для візуалізації та диференціювання хромосом.
Визначення каріотипу пацієнта
У нормі каріотип людини складається із 46 хромосом: 22 пари аутосом та дві статеві хромосоми.
46, XX – нормальний каріотип жінки
46, XY – нормальний каріотип чоловіка
Хромосомні синдроми – це захворювання, які зумовлені змінами у кількості (анеуплоїдії) чи у структурі (делеції, транслокації, інверсії, дуплікації тощо) окремих хромосом у каріотипі пацієнта. Хромосомні синдроми виникають внаслідок мутацій у статевих клітинах батьків або можуть передаватись від батьків-носіїв збалансованих хромосомних перебудов дітям. Частота хромосомних аномалій серед новонароджених складає 5–7 на 1000, але у групах дітей із затримкою розумового розвитку — 8–20%, згідно з даними різних авторів.
Практично всі хромосомні синдроми характеризуються:
- Різними нервово-психічними розладами;
- Множинними вродженими вадами розвитку (МВВР) різних систем та органів, порушенням статевого розвитку;
- Різними стигмами дизембріогенезу (незначні анатомічні відхилення);
- Відставанням у рості та розвитку (пренатальне або постнатальне).
Частота хромосомних аномалій, які виявляються в групі пацієнтів з проблемами репродукції, складає 4–5%, а у групі чоловіків з порушенням сперматогенезу вона може сягати 13–15%. Цитогенетична діагностика для пацієнтів, перед лікуванням методами ДРТ, спрямована на виключення хромосомної патології чи носійства збалансованих хромосомних перебудов у фенотипово здорового подружжя, а значить, – на профілактику виникнення хромосомної патології у їхніх майбутніх дітей. Крім того, вона допомагає лікарям визначитись з методом лікування непліддя.
Основні показання до виконання каріотипування
- Обстеження сімейної пари:
- Планування вагітності;
- Непліддя;
- Невиношування вагітності, викидні та завмирання плоду;
- Затримка розумового розвитку дитини;
- Вади розвитку плода, мертвонародження, випадки спонтанної дитячої смертності плоду;
- Обстеження пацієнта:
- Вроджені вади розвитку;
- Первинна чи вторинна аменорея, передчасна менопауза;
- Чоловічий фактор непліддя, порушення сперматогенезу;
- Клінічно значущий аномальний ріст;
- Затримка розумового розвитку або затримка фізичного розвитку.
- Для донорів яйцеклітин та сперматозоїдів
Підготовка пацієнта
Відбір крові виконується:
- Не раніше, ніж через два тижні після прийому антибіотиків, цитостатинів, хіміотерапевтичних та гормональних препаратів;
- Не раніше, ніж через два тижні після перенесених вірусних та інших захворювань, що супроводжуються підвищенням температури;
- Виключити з раціону пацієнта жирне, смажене, алкоголь за 1-2 дні до дослідження.
Матеріал для дослідження: венозна кров об’ємом 2мл, набрана в моновет Li-Heparin LH/2,7ml.
Референтні значення:
46, XX – нормальний каріотип жінки
46, XY – нормальний каріотип чоловіка
Складання каріограм згідно номенклатури ISCN 2013
ВАЖЛИВО! Інтерпретація результатів виконується лікарем-генетиком.
